甘蔗是全球最重要的糖料和能源作物之一,其生產(chǎn)卻面臨著嚴(yán)峻的生物脅迫挑戰(zhàn)。你知道嗎?每年因?yàn)椴≡秃οx的侵襲,甘蔗產(chǎn)量損失多達(dá)20%(參考文獻(xiàn)[1])!這一數(shù)字不僅意味著種植者承受著慘重的經(jīng)濟(jì)損失,更可能引發(fā)全球糖業(yè)市場(chǎng)的連鎖反應(yīng),糖價(jià)波動(dòng),最終影響終端消費(fèi)者的切身利益。
甘蔗黑穗病
(圖片來源:參考文獻(xiàn)[2])
面對(duì)這些病害,甘蔗自身有沒有辦法抵抗呢?其實(shí),植物和人類一樣,也有自己的“免疫系統(tǒng)”。其中,NLR基因就像是甘蔗體內(nèi)的“特種部隊(duì)”,專門負(fù)責(zé)識(shí)別和抵抗入侵的病菌。它們屬于植物免疫系統(tǒng)的核心組成部分,可分為TIR-NLR(TNL)和CC-NLR(CNL)等亞類。不過,有研究揭示,在單子葉植物(被子植物的一大類,其種子僅含一片子葉)中TNL在進(jìn)化過程中丟失,甘蔗也屬于這類植物。
NLR基因編碼的蛋白質(zhì)能精準(zhǔn)探測(cè)到病菌的攻擊,并快速啟動(dòng)防御反應(yīng),就像植物界的“雷達(dá)預(yù)警系統(tǒng)”。但問題是——甘蔗的基因組極其復(fù)雜(多倍體且染色體數(shù)目龐大),這些基因一直很難被精準(zhǔn)定位。這就導(dǎo)致甘蔗的抗病機(jī)制難以破解,育種專家就像在沒有地圖的情況下尋找一把鑰匙,既不知道鑰匙在哪,也不知道它長什么樣,抗病品種選育效率極低。
NLR基因識(shí)別和抵抗入侵病菌示意圖
(圖片來源:作者)
最近,我們團(tuán)隊(duì)(中國科學(xué)院微生物研究所林嘯研究團(tuán)隊(duì))開發(fā)了一個(gè)新工具DaapNLRSeek,專門用于精準(zhǔn)預(yù)測(cè)甘蔗中的NLR類抗病基因。該工具利用甘蔗近緣的二倍體植物高粱和蔗茅的基因數(shù)據(jù)作為參考,結(jié)合多種工具,在多倍體甘蔗基因組中更準(zhǔn)確地識(shí)別和注釋抗病基因(參考文獻(xiàn)[3])。該研究不僅為甘蔗抗病育種提供了重要基礎(chǔ),也為其他多倍體植物的NLR基因預(yù)測(cè)提供了參考。
參考“近親”,開發(fā)新工具定位甘蔗NLR基因
在開發(fā)新工具之前,尋找甘蔗的抗病基因面臨重重困難,這主要是由兩個(gè)原因?qū)е碌模?/p>
1.基因組太復(fù)雜
常見的農(nóng)作物比如水稻、高粱的基因組為二倍體,共20條染色體,但甘蔗不一樣。以甘蔗栽培種R570為例,其染色體數(shù)目高達(dá)114條!且呈現(xiàn)非整倍體特征,即不同染色體的拷貝數(shù)參差不齊——有的染色體可能有8個(gè)拷貝,有的卻只有6個(gè)或7個(gè)。這種情況就像要在一座藏書數(shù)百萬冊(cè)的超級(jí)圖書館里,尋找一本沒有編號(hào)的特殊書籍。更棘手的是,這本書不僅存在多個(gè)相似版本(同源基因),而且每個(gè)版本的章節(jié)順序還略有不同(等位基因變異),甚至有些頁面還是殘缺不全的(基因組組裝空白區(qū))。
(圖片來源:作者使用AI生成)
2.抗病基因會(huì)“變裝”
NLR基因家族在進(jìn)化過程中經(jīng)常復(fù)制、重組,導(dǎo)致它們的序列千變?nèi)f化,用普通方法很難準(zhǔn)確識(shí)別。通常會(huì)出現(xiàn)兩種情況:
一種是種特異性擴(kuò)張。例如,甘蔗的NLR基因數(shù)量(R570大約有3528個(gè))遠(yuǎn)超高粱(Btx623約334個(gè)),部分基因簇經(jīng)過復(fù)制形成“抗病基因簇”。
另一種則是假基因干擾。多倍化導(dǎo)致部分NLR基因拷貝功能喪失(如缺失關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域),但這些非功能性序列仍在基因組中留存,顯著增加了基因注釋的復(fù)雜性和難度。
鑒于甘蔗的基因組太復(fù)雜,如品種XTT22的NLR基因數(shù)量高達(dá)5827個(gè),傳統(tǒng)人工注釋方法面臨巨大挑戰(zhàn)。于是,我們換了個(gè)思路——找甘蔗的“親戚”幫忙!甘蔗的近親高粱和蔗茅的基因組相對(duì)簡單,它們的NLR基因和甘蔗很相似。于是,我們團(tuán)隊(duì)先在高粱和蔗茅中精準(zhǔn)定位NLR基因,再用這些信息去甘蔗基因組里“搜捕”類似的基因。
我們開發(fā)的DaapNLRSeek結(jié)合了多種工具,以高粱和蔗茅的NLR基因?yàn)閰⒖?,通過檢索、注釋和結(jié)構(gòu)域驗(yàn)證這三步來精準(zhǔn)定位和注釋甘蔗中的NLR基因。
(圖片來源:作者使用AI生成)
研究發(fā)現(xiàn):找出大量抗病基因
借助DaapNLRSeek,我們?cè)趯ふ腋收峥共』蚍矫娅@得了一定成就:
1.找到2萬多個(gè)抗病基因
在5個(gè)甘蔗品種中,我們的研究預(yù)測(cè)出了20904個(gè)NLR基因,比傳統(tǒng)方法多出了7%-48%!
2.“配對(duì)NLR基因”圖像:“感應(yīng)器+開關(guān)”
研究還發(fā)現(xiàn)了兩對(duì)“配對(duì)NLR基因”(G9-1/G9-2、G14-1/G14-2),它們就像“搭檔”一樣工作,通常由一個(gè)“傳感器”(負(fù)責(zé)識(shí)別病原體)和一個(gè)“執(zhí)行器”(負(fù)責(zé)激活免疫反應(yīng))組成,通過蛋白互作實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)調(diào)控。同時(shí),G9-2和G14-1攜帶的蛋白激酶結(jié)構(gòu)域?yàn)椴≡R(shí)別提供了天然的改造靶點(diǎn)。
這類“配對(duì)NLR基因”在水稻中也曾被報(bào)道——RGA4和RGA5基因?qū)?。其中,RGA4負(fù)責(zé)“拉警報(bào)”,通過觸發(fā)植物細(xì)胞死亡來啟動(dòng)防御反應(yīng);RGA5則像“識(shí)別器”,既能作為病原體的受體,又能抑制RGA4引起的植物過度免疫反應(yīng),從而維持植物免疫系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)平衡。
3.抗病基因的“遠(yuǎn)古擴(kuò)張”
研究發(fā)現(xiàn),甘蔗的NLR基因家族早在高粱和蔗茅分化時(shí)就已發(fā)生大規(guī)模擴(kuò)張,比甘蔗自身發(fā)生復(fù)雜多倍體化事件的時(shí)間還早。
助力甘蔗抗病育種,推動(dòng)綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展
1.減少對(duì)農(nóng)藥的依賴,保護(hù)環(huán)境
借助該工具幫助科學(xué)家找到甘蔗中的抗病基因,輔助抗病品種的培育,減少對(duì)農(nóng)藥的依賴。
2.“配對(duì)NLR基因”可作為工程化改造的載體
通過結(jié)構(gòu)域替換或特異性改造,“配對(duì)NLR基因”可被設(shè)計(jì)為能夠識(shí)別不同病原體的新型抗病系統(tǒng)。
3.推廣到其他作物
這一方法不僅適用于甘蔗抗病育種,還能為小麥、馬鈴薯等多倍體作物的抗病基因挖掘提供新思路,從而為保障全球糧食安全作出重要貢獻(xiàn)。
甘蔗病害防治面臨重大挑戰(zhàn),但是隨著測(cè)序技術(shù)的快速發(fā)展及其成本的不斷降低,近年來逐漸有高質(zhì)量甘蔗染色體水平的基因組被拼裝?;谶@些數(shù)據(jù),我們便可在基因?qū)用嫔涎芯扛收岬倪M(jìn)化及其關(guān)鍵農(nóng)藝性狀的遺傳機(jī)制。這項(xiàng)研究便是在已有的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上開發(fā)出新的工具,挖掘出了甘蔗基因組中隱藏的信息。
這一成果不僅深化了我們對(duì)植物免疫系統(tǒng)的認(rèn)知,更為未來的綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新方向、新路徑。
參考文獻(xiàn):
[1]MuhammadAslamRajputetal.“SugarcaneSmut:CurrentKnowledgeandtheWayForwardforManagement”JournalofFungi(Basel,Switzerland)7,no.12(2021):1095.
[2]Bhuiyan,ShamsulA.,etal.“Sugarcanesmut,causedbySporisoriumscitamineum,amajordiseaseofsugarcane:acontemporaryreview.”Phytopathology?111.11(2021):1905-1917.
[3]Huang,Yiting,YingfengLuo,andXiaoLin.“DaapNLRSeek,predictionandevolutionofresistancegenesinpolyploidsugarcanegenomes.”iScience(2025).
出品:科普中國
作者:黃依婷(中國科學(xué)院微生物研究所)
監(jiān)制:中國科普博覽
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